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タイトル: 燐光偏光に基づく電位センサー回転運動の定量解析
その他のタイトル: Analysis of rotational motion of voltage sensor domain based on phosphorescence polarization
著者: 筒井, 秀和
著者(別表記): Tsutsui, Hidekazu
キーワード: 電位センサードメイン
燐光偏光
膜電位固定
発行日: 14-Jun-2018
抄録: 電位センサードメインの状態遷移機構を調べる事を目的に、燐光色素の偏光を利用したセグメント回転の時系列観測系を構築した。燐光計測に必要な低酸素下では膜が顕著に脆弱になる事、及び、背景光の寄与を正しく見積る事が困難な事、という二つの主要な課題により、信頼性のある定量計測には至らなかった。今後、全反射照明系を用いて背景光を低減させる、より明るい燐光色素や特異性の高いラベル手法を用いる事で対処できる可能性がある。研究最終年度には、環境応答性の非天然アミノ酸を用いて、電位センサーがグローバルな構造変化を行うことを示した。また、電位センサーの二価カチオン透過性に関する諸性質を明らかにした。:To investigate the transition mechanism of the voltage-sensor domain, an experimental setup for detecting segment rotation using phosphorescence polarization was built. The reliable quantitative measurements were not reached due to the two major problems that the membrane becomes remarkably fragile under the low oxygen condition required for the phosphorescence measurement and that it is difficult to correctly estimate the contribution of non-specific binding of phosphorescence dye to membrane. In the future, there is a possibility that it can be dealt with by using a brighter phosphorescent dye or a highly specific labeling technique that reduces the background light by using a total reflection illumination system. In the final year of the research period, we showed that the potential sensor performs global structural change by using environmentally responsive unnatural amino acid. We also clarified some unique properties of divalent cation permeability of CatSper voltage-sensor.
記述: 挑戦的萌芽研究
研究期間:2014~2017
課題番号:26670103
研究者番号:30392038
研究分野:生理学
言語: jpn
URI: http://hdl.handle.net/10119/15402
出現コレクション:2017年度 (FY 2017)

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